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El L.T.I. dispone actualmente de los siguientes aparatos,
kits y reactivos relacionados con el análisis de ácidos nucleicos:
Secuenciador MegaBACE 500 (Amersham Biosciences).
Separación por electroforesis capilar (48 capilares). Capacidad de
detección de 4 fluoróforos simultáneamente.
Secuenciador ALF (Amersham Biosciences). Separación por geles de
poliacrilamida. Capacidad 10 clones. Detección de un solo fluoróforo.
Pyrosecuenciador PSQTM96 MA de Biotage. Basado en la tecnología de “pyrosequencing” que utiliza una reacción en cascada de 4 enzimas y sustratos específicos con el resultado de producción de luz por cada nucleótido incorporado. La detección se realiza a tiempo real mediante una cámara CCD de alta sensibilidad.
Características: capacidad de 1 a 96 muestras en placa de PCR, permite analizar SNPs, mutaciones, inserciones/deleciones, estudios de frecuencia alélica, haplotipos, etc, posibilidad de trabajo en modo “multiplexing” hasta 3 muestras en un único pocillo, tiempo de análisis alrededor de 15 minutos/placa de PCR.
Analizador de DNA Modelo 4300S de Li-Cor. Detección rápida de polimorfismos (SNPs, inserciones, delecciones o variaciones de tamaño de microsatélites). Está basado en la electroforesis del DNA en gel de poliacrilamida con detección simultánea de fluorescencia infrarroja a 685 y 785 nm, generando una doble imagen de 16 bit que se puede analizar en softwares convencionales de tratamiento de imágenes. Capacidad de procesar 24, 48 o 96 muestras simultáneamente según el peine usado.
PCR cuantitativa ABI PRISM 7000 (Applied Biosystem).
• PCR cuantitativa SmartCycler (Cepheid).
Termociclador en gradiente PTC-200 (MJ Research).
Polimerizador de geles por luz UV ReproSet (Amersham Biosciences).
Kit de purificación de DNA GFX Micro plasmid prep (Amersham
Biosciences).
EXO SAP (Amersham
Biosciences).
Kit de secuenciación MegaBACE DYEnamic ET dye terminator kit
(Amersham Biosciences).
Kit de secuenciación Thermosequenase cycle sequencing kit
(Amersham Biosciences).
Kit de SNP MegaBace SnuPe genotyping kit (Amersham Biosciences).
MegaBACE ET400-R size standard.
MegaBACE SnuPe Multiple Injection Marker.
El Servicio cuenta con los programas informáticos adecuados para el tratamiento de los resultados. Dichos programas están también a disposición de los usuarios pertenecientes a Departamentos de la Universidad de León.
Sequencing software suite v3.0: Para ver y editar secuencias. Los fluorogramas pueden abrirse también con el programa "Chromas", disponible en la web en la dirección:
www.technelysium.com.au/chromas14x.html
Genetic Profiler v2.2: Para el genotipado de microsatétites y análisis de fragmentos en general.
SNP Profiler v1.0: permite la detección de los SNPs y la asignación automatica de alelos.
Primer Express v2.0: Para el diseño óptimo de cebadores y sondas.
PSQ Assay Design
PSQ 96MA 2.1.1.
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